胚胎成纤维细胞与含LIF的培养体系支持鼠造血祖细胞体外扩增

摘要

为了探讨胚胎成纤维细胞与含白血病抑制因子(LIF)的培养体系对鼠骨髓造血祖细胞体外扩增效应,并观察其对造血表面归巢相关黏附分子VLA-4(CD49d)、VLA-5(CD49e)、LFA-1(CD11a)、HCAM(CD44)、L-selectin(CD62L)的表达影响,将丝裂霉素C灭活的鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和含LIF的培养体系与鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)体外共同培养7天,检测BMMNC细胞总数、CFC、Sca-1+细胞百分率、细胞凋亡率和Sca-1+细胞表面黏附分子CD49d、CD49e、CD11a、CD44、CD62L的表达率.结果表明:MEF和含LIF的培养体系明显扩增了BMMNC细胞总数、CFC和Sca-1+细胞,抑制细胞凋亡(P《0.05),而去掉MEF和LIF后的对照组培养体系BMMNC细胞总数明显下降,CFC和Sca-1+细胞完全死亡,细胞大部分凋亡(P《0.01).扩增后Sca-1+细胞表面各黏附分子CD49d、CD44和CD61L表达与扩增前相当(P《0.05),而CD49e和CD11a表达明显高于扩增前(P《0.05).结论:胚胎成纤维细胞和含LIF的培养体系体不仅可以体外显著扩增鼠骨髓造血祖细胞,而且扩增后的造血祖细胞(HPC)总体上保持其表面归巢相关黏附分子的表达,扩增后HPC归巢功能不受影响.