TGF-β1和(或)三氧化二砷作用于HL-60细胞后P27KiP1表达及凋亡情况的研究

摘要

本研究观察三氧化二砷(As2O3)和/或TGF-β1对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响,以及作用前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclin E和BCL-2的变化情况.As2O3和/或TGF-β1作用于HL-60细胞,用细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期改变情况,应用免疫组织化学检测药物处理前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclin E以及BCL-2表达的变化情况.结果表明:As2O3和TGF-β1单用均可以诱导HL-60细胞发生凋亡,联合处理对HL-60细胞生长抑制作用强于单药处理,其中5μmol/L As2O3作用最强,5 ng/ml TGF-β1处理可引起HL-60细胞的细胞周期阻滞于G1期(P＜0.05).5 ng/ml TGF-β1和联合处理组P27KiP1的表达较对照组增强(P＜0.05);5μmol/L As2O3处理组P27Kip1的表达与对照组比较无明显差异(P＞0.05).5 ng/ml TGF-β1和联合处理组均可见cyclin E蛋白表达下调(p＜0.05).5μmol/L As2O3和联合处理组可见内源性TGF-β1表达上调(P＜0.05).结论:As2O3、外源性TGF-β1均可诱导HL-60细胞凋亡,联合处理组诱导凋亡作用强于对照组和单药处理组,TGF-β1处理可引起HL-60细胞周期阻滞于G1期.TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡过程中P27Kip1表达增强,拮抗cyclin E和BCL-2的作用,细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡,这表明P27Kip1是TGF-β引起细胞周期阻滞的关键效应物,外源性TGF-β1又通过上调内源性TGF-β1的表达增强As2O3诱导原代APL细胞凋亡的作用.