p27kip1

摘要： 基于细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p27^(Kip1)信号通路探究异钩藤碱(isorhynchophylline,IRN)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的作用及机制。C57BL/6J小鼠48只,随机正常组、BLM组、BLM+IRN(10、20 mg/kg)两个剂量组,每组12只。气管注射BLM(5000 U/kg)诱导PF小鼠模型,造模后连续灌胃给药21天。HE和Masson染色观察肺组织病理变化及胶原沉积情况。免疫组化检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。体外培养小鼠原代肺成纤维细胞,实验设对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)(10 ng/mL)组和TGF-β1+IRN(5、10、20μmol/L)三个剂量组。EdU掺入法和流式细胞术检测细胞增殖,Transwell观察细胞的迁移能力。RT-qPCR检测肺组织或肺成纤维细胞TGF-β1、collagen I和α-SMA mRNA的表达。Western blot检测肺组织和(或)肺成纤维细胞TGF-β1、collagen I、α-SMA、p-ERK1/2,p27^(Kip1)、CDK2和Cyclin E1的蛋白水平。动物实验结果显示,与BLM组相比,不同剂量IRN均能明显减轻肺组织结构的损伤、降低炎症细胞的浸润和胶原的沉积;此外,IRN不同程度地降低肺组织TGF-β1、collagen I和α-SMA mRNA和蛋白的表达;同时,IRN还抑制了肺组织ERK1/2的磷酸化、上调p27^(Kip1)和下调CDK2和Cyclin E1的蛋白表达。细胞实验结果显示,与TGF-β1组相比,不同剂量IRN能够明显抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞增殖、显著降低细胞迁移能力;明显降低TGF-β1诱导的collagen I和α-SMA mRNA和蛋白的表达,同时降低ERK1/2的磷酸化水平、上调p27^(Kip1)和下调CDK2和Cyclin E1的蛋白表达。以上结果表明IRN可能通过抑制ERK1/2信号通路、上调p27^(Kip1)的表达而抑制了肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,从而减轻了BLM诱导的PF。

摘要： 目的小鼠内耳支持细胞能诱导羊水干细胞(amniotic fluid stem cells,AFS)定向分化为功能性神经元,但其可能的调控机制仍未明确。本研究从AFS接种密度、内耳支持细胞来源及细胞周期蛋白激酶抑制因子P27^(kip1)表达差异入手,研究上述因素与AFS神经元定向分化的关系。方法分别将不同密度AFS(2×10^(5)、4×10^(5)、6×10^(5)、8×10^(5)、10×10^(5)),接种在内耳支持细胞饲养层表面,观察不同密度对神经元分化突起数量和长度的影响;将AFS分别接种于基底膜和前庭组织来源的饲养层表面,比较内耳支持细胞P27^(kip1)表达差异及其对神经元分化的影响。结果AFS以高密度(10×10^(5))接种于饲养层能产生更多形态典型的神经元(20倍镜视野下,平均208±25.7条神经突起),相对于低密度(2×10^(5))接种(20倍镜视野下,平均41±12.3条神经突起)存在统计学差异(P0.05)。前庭来源饲养层促分化能力较基底膜强,两种饲养层细胞均表达内耳支持细胞标记物P27^(kip1),前庭P27^(kip1)表达量(79.8±8.0%)明显高于基底膜(46.9±9.7%)(P<0.01);内耳支持细胞饲养层P27^(kip1)表达量与分化所得的神经突起的数量和长度呈正相关。结论AFS接种密度以及内耳支持细胞P27^(kip1)表达水平可能共同参与调控AFS向神经元的定向分化。

摘要： 目的 研究宫颈癌前病变组织中半乳糖凝集素-3 (Galectin-3)和P27 kip1蛋白的表达与临床预后的关系。方法 选择2017年1月-2018年1月宜宾市第二人民医院/四川大学华西医院宜宾医院诊断的宫颈上皮内瘤样变患者74例,依据病理结果分为3组(CINⅠ组20例,CINⅡ组24例,CINⅢ组30例),手术切除病变组织,采用免疫组化染色法检测并比较3组患者组织中Galectin-3和P27 kip1蛋白的阳性表达率。采用PCR和Western blot法检测并比较3组患者Galectin-3和P27 kip1、血管内皮生长因子(VEGF)-2和cyclinD的mRNA和蛋白的定量表达。随访中位时间16.5个月,比较3组患者宫颈癌的复发率。结果 CINⅢ组患者Galectin-3阳性表达率高于CINⅠ和Ⅱ组,P27 kip1阳性表达率低于CINⅠ和Ⅱ组,差异有统计学意义(P<0.05);CINⅢ组患者Galectin-3、VEGF-2和cyclinD的mRNA和蛋白的定量表达水平高于其他两组,P27 kip1低于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,mRMA表达上:Galectin-3与VEGF-2和cyclinD呈正相关(r=0.725、0.746,P=0.019、0.013),P27 kip1与VEGF-2和cyclinD呈负相关(r=-0.803、-0.821,P=0.008、0.003),Galectin-3与P27 kip1呈负相关(r=-0.689,P=0.032);蛋白质表达上,Galectin-3与VEGF-2和cyclinD呈正相关(r=0.733、0.752,P=0.016、0.011),P27kip1与VEGF-2和cyclinD呈负相关(r=-0.842、-0.868,P=0.007、0.001),Galectin-3与P27 kip1呈负相关(r=-0.645,P=0.029);CINⅢ组复发率为36.67%,高于CINⅠ组的5.00%和CINⅡ组的12.50%,差异有统计学意义(P<0.05);Galectin-3阳性表达患者复发率高于阴性表达患者,P27 kip1阴性表达患者复发率高于阳性表达患者(P<0.05)。结论 CIN组织中Galectin-3表达上调和P27 kip1表达下调可能与肿瘤进展相关,还需要进一步验证。

摘要： 目的:探究槲皮素通过调控p21/cip1和p27/kip1蛋白的稳定性对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的影响.方法:CCK-8试剂盒检测口腔鳞状细胞癌细胞(SCC-15)增殖情况;流式细胞术检测SCC-15细胞周期分布;Western blot检测CyclinD1/CDK复合体、p21/cip1、p27/kip1、p-GSK3β、GSK3β、p53和c-Myc蛋白表达;qRT-PCR检测SCC-15细胞p21/cip1和p27/kip1 mRNA表达;激光共聚焦显微镜检测SCC-15细胞中p21/cip1和p27/kip1蛋白亚细胞定位;放线菌酮蛋白合成抑制实验检测SCC-15细胞中p21/cip1和p27/kip1蛋白半衰期.结果:与对照组相比,槲皮素呈剂量依赖性(6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L)抑制SCC-15细胞增殖(P0.05).结论:槲皮素通过调控p21/cip1和p27/kip1蛋白的稳定性抑制口腔鳞状癌细胞增殖.

摘要： 目的 探讨扶正抗癌方阻滞H460细胞周期的分子机制.方法 CCK8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期,Real-time PCR检测miR221-3p及p27Kip1 mRNA表达,Western blot检测p27Kp1、Cyclin D1、Cyclin E、CDK2和CDK4表达,荧光素酶报告基因检测miR221-3p是否与p27Kip13,UTR结合.结果 与对照组比较,给药组细胞存活率降低(P＜0.01),G0/G1期细胞增加、S期细胞减少(P＜0.05),Cyclin D1、Cyclin E、CDK2和 CDK4蛋白表达降低(P＜0.05),p27Kip1 蛋白和 mRNA 表达增加(P＜0.05),miR221-3p表达降低(P＜0.01);与阴性对照组比较,miR221-3p mimics组p27Kip1mRNA表达降低(P＜0.01);与 nc-inhibitor 组比较,miR221-3p mimics 组 p27Kip1 mRNA表达增加(P＜0.01);与阴性对照组比较,转染p27Kip1野生型质粒的荧光素酶活性降低(P＜0.01).结论 扶正抗癌方下调miR221-3p表达,上调p27Kip1表达,调控CyclinD1、Cyclin E、CDK2和CDK4表达,阻滞细胞周期在G0/G1期抑制增殖.

摘要： 目的 观察消岩汤对WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的抑制作用,以及WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平变化,探索消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲降的MCF-7细胞增殖的分子机制.方法 WISP2/CCN5 shRNA慢病毒质粒转染MCF-7细胞,构建WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞系,采用高、中、低浓度的消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞24、36及48 h后,检测细胞增殖抑制率、WISP2/CCN5、Skp2及p27Kip1的mRNA和蛋白水平.结果 WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖抑制率低于空白组和空载组(P<0.05),消岩汤干预组细胞增殖抑制率高于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05);高浓度消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞48 h组细胞增殖抑制率高于相同浓度孵育24 h组(P<0.05).WISP2/CCN5基因敲减组Skp2 mRNA和蛋白水平均高于空白组和空载组(P<0.05,P<0.05),而p27Kip1 mRNA和蛋白水平则低于空白组和空载组(P<0.05,P<0.05).消岩汤干预组的Skp2 mRNA和蛋白水平低于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05,P<0.05),而p27Kip1 mRNA和蛋白水平则高于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05,P<0.05).结论 消岩汤干预WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞,在mRNA和蛋白水平下调Skp2表达,上调p27Kip1表达,抑制MCF-7细胞增殖;2.高浓度消岩汤对细胞增殖活性的抑制较显著,孵育时间较长组对细胞增殖活性的抑制较显著.

摘要： 目的 研究OCT4和P27 kip1蛋白在肺癌中的表达及其相关性,并探讨与肺癌临床病理参数的关系.方法 采用免疫组织化学SP法对30例肺癌标本OCT4和P27 kip1的表达进行检测.结果 肺癌标本OCT4和P27 kip1蛋白阳性表达分别为66.7％和73.7％,且OCT4和P27 kip1的表达水平与患者年龄、性别无明显关联,而与肿瘤转移有关.OCT4和P27 kip1在肺癌中的表达存在负相关(rs=-0.426,P<0.05).结论 OCT4和P27kip1呈负相关性,可能在肺癌的发生发展过程中起关键作用,为肺癌诊治的研究提供了新的思路.

摘要： 目的研究OCT4和P27^kip1蛋白在肺癌中的表达及其相关性,并探讨与肺癌临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学SP法对30例肺癌标本OCT4和P27^kip1的表达进行检测。结果肺癌标本OCT4和P27^kip1蛋白阳性表达分别为66.7%和73.7%,且OCT4和P27^kip1的表达水平与患者年龄、性别无明显关联,而与肿瘤转移有关。OCT4和P27^kip1在肺癌中的表达存在负相关(rs=-0.426,P<0.05)。结论OCT4和P27^kip1呈负相关性,可能在肺癌的发生发展过程中起关键作用,为肺癌诊治的研究提供了新的思路。

摘要： 目的：构建小鼠p27kip1真核表达载体，探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响，为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法：将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上，并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中，应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。结果：经酶切分析和测序鉴定，成功构建了小鼠pcDNA3.0／p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0／p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多，其生长增殖不仅受到明显抑制，而且处于Gl／GO期的细胞显著增加，处于S期的细胞显著减少。结论：构建的pcDNA3.0／p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达，且高表达的pcDN．A3.0／p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长。

摘要： 目的：构建小鼠p27kip1真核表达载体，探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响，为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法：将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上，并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中，应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。结果：经酶切分析和测序鉴定，成功构建了小鼠pcDNA3.0／p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0／p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多，其生长增殖不仅受到明显抑制，而且处于Gl／GO期的细胞显著增加，处于S期的细胞显著减少。结论：构建的pcDNA3.0／p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达，且高表达的pcDN．A3.0／p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长。

摘要： 目的：构建小鼠p27kip1真核表达载体，探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响，为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法：将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上，并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中，应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。结果：经酶切分析和测序鉴定，成功构建了小鼠pcDNA3.0／p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0／p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多，其生长增殖不仅受到明显抑制，而且处于Gl／GO期的细胞显著增加，处于S期的细胞显著减少。结论：构建的pcDNA3.0／p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达，且高表达的pcDN．A3.0／p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长。

摘要： 本研究应用real-time RT-PCR方法枪测了26例肠癌及瘤旁正常组织中P27 kipl及CTGF基因mRNA的表达情况，探讨其与肠癌发生、发展及转移的关系。

摘要： 本研究应用real-time RT-PCR方法枪测了26例肠癌及瘤旁正常组织中P27 kipl及CTGF基因mRNA的表达情况，探讨其与肠癌发生、发展及转移的关系。

摘要： 本研究应用real-time RT-PCR方法枪测了26例肠癌及瘤旁正常组织中P27 kipl及CTGF基因mRNA的表达情况，探讨其与肠癌发生、发展及转移的关系。

摘要： 本研究应用real-time RT-PCR方法枪测了26例肠癌及瘤旁正常组织中P27 kipl及CTGF基因mRNA的表达情况，探讨其与肠癌发生、发展及转移的关系。

摘要： 本申请实施例中提供了一种4K8KIP制播调度控制方法，能够节约路由器表项以及网络带宽，特别适合用于大规模、无阻塞调度切换场景。所述4K8KIP制播调度控制方法包括：一种4K8KIP制播调度控制方法，包括：根据实际网络带宽构建由高到低的不同等级的流和/或流组，由高到低的次序为：8K流组4k流组4K流组的单流；在调度时，通过从高等级中抽取共享的低等级的流和/或流组使用。

摘要： 本发明提供了能够结合细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B的各种化合物及其药学上可接受的盐。该化合物可具有根据如本文所详述的式I或式II的结构。该化合物可包括SJ747、SJ749、SJ755、SJ757。还提供了含有该化合物或药学上可接受的盐的药物制剂及其使用方法。该制剂和方法可用于治疗癌症。在一些方面，癌症与固有无序蛋白p27的错误定位有关。在一些方面，癌症对抗癌疗法具有抗性。因此，该药物制剂可包括第二活性剂和/或可与第二活性剂诸如癌症治疗剂组合给药。在各个方面，还提供了使用本文所述的化合物和制剂在有此需要的受试者中促进重新进入细胞分裂周期的方法。

摘要： 本实用新型涉及一种基于检测P57kip2和TGF‑β1判断食管鳞癌发生发展的试剂盒，属于医学和生物学检测领域，包括盒体及设置在盒体开口处的盒盖，盒体内垂直设置有四根伸缩套杆Ⅱ，伸缩套杆Ⅱ内套设有伸缩套杆Ⅰ，盒体内穿过四根伸缩套杆Ⅱ设置有隔板，四根伸缩套杆Ⅰ的自由端均与滑块固定连接，滑块设置在滑槽内，滑槽开设在上盒体Ⅰ和上盒体Ⅱ的前后两侧，上盒体Ⅰ和上盒体Ⅱ的上端面以及隔板上均开设有容纳孔。本实用新型能将上下层试剂盒分离，且无需将上层试剂盒移至实验台，不占据较多的实验空间，对试剂管取放方便；固定效果好，避免试剂管晃动。通过试剂能进行免疫组织化学染色，检测P57kip2和TGF‑β1的表达，从而判断食管鳞癌的发生、发展情况。

摘要： 本实用新型涉及一种拉线门型塔带电更换二七四号铁专用卡具，其特征在于：卡具中间安装有限位器，两端与省力丝杠连接，“U”型环一端连接在丝杠上，另一端螺丝固定孔，卡具上开有对称的定位的弧形卡槽，卡槽内侧设有对称的“I”型限位螺栓。其不需要停电的前提下即可更换二七四号铁，使用方便、安全、快捷；工作效率提高了四倍，更换1处仅需要55分钟；将原来近1吨的工具，简化到不足25公斤，人员配置由12人可缩减至5人，劳动强度大大降低，不需占用和使用线路下方通道的耕地，简化了繁杂的工作程序，节约了成本。