替莫唑胺对U373胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的抑制作用及其分子调控机制的研究

摘要

目的 研究替莫唑胺对U373胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的抑制作用及其分子调控机制.方法 将U373胶质瘤细胞分别用0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L替莫唑胺处理,培养48 h.用control siRNA、siPTPN1、pcDNA3.1空载体及pcDNA3.1/PTPN1,分别转染用400μmol/L替莫唑胺处理的细胞.用CCK-8法和Transwell实验检测替莫唑胺对U373细胞增殖、侵袭能力的影响.用Western blot检测各组细胞的PTPN1、C-myc、Cyclin D1、PI3K、p-mTOR和p-AKT蛋白的表达水平.结果 与空白对照组相比,各替莫唑胺处理组U373细胞的增殖和侵袭能力均显著下降(P<0.05～0.01),PTPN1的表达水平显著降低(P<0.05～0.01);其中以400μmol/L替莫唑胺处理组细胞的增殖、侵袭能力及PTPN1表达水平最低(均P<0.01).与pcDNA3.1空载体转染组相比,过表达PTPN1组U373细胞的PTPN1蛋白表达水平,以及增殖和侵袭能力均显著增高(均P<0.01).与control siRNA转染组相比,siPTPN1转染组U373细胞的PTPN1蛋白表达水平及增殖和侵袭能力均显著下降(均P<0.01).替莫唑胺处理细胞的C-myc、Cyclin D1、PI3K、p-mTOR和p-AKT表达水平均显著降低(P<0.05～0.01).PTPN1过表达细胞的C-myc、Cyclin D1、PI3K、p-mTOR和p-AKT表达水平显著升高(均P<0.01);而PTPN1表达沉默细胞的C-myc、Cyclin D1、PI3K、p-mTOR和p-AKT的表达水平则明显降低(均P<0.05).结论 替莫唑胺可通过下调胶质瘤细胞的PTPN1表达影响mTOR信号通路,抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力.