运用树脂支撑体外培养系统观察小鼠食管胚胎发育的可行性研究

摘要

目的 探讨树脂支撑体外培养系统观察小鼠食管胚胎发育的可行性.方法 选用健康C57BL/6J小鼠,分离胚胎期(embryonic day,E)第16.5天(E16.5)小鼠食管组织,置于树脂片和硝酸纤维素膜上,培养于含20％胎牛血清、0.1％维生素C、1％L-谷氨酰胺和1％庆大霉素/链霉素的DMEM液,5％ CO2、37℃恒温箱中培养6d,与在体E16.5d和出生后(postnatal day,PN)第0.5天(PN0.5)食管组织一同进行苏木素-伊红染色,抗增殖细胞核抗原(PCNA)抗体、抗平滑肌肌动蛋白(SMA)抗体和抗肌细胞生成素(myogenin)抗体免疫组织化学染色.结果 ①培养后食管组织结构完整,上皮层与肌层较培养前明显增厚;②培养后食管各层仍广泛分布具有增殖能力的细胞,与E16.5相比PCNA阳性率差异无统计学意义(P=1.000);③培养后平滑肌仍保持清晰分层,骨骼肌成肌细胞增多,且分布模式与PN0.5一致.结论 树脂支撑体外培养系统可以为探索小鼠食管正常发育过程及疾病的发病机制提供一个较为简便实用的模型.