Ficoll分离法富集脐带血自然杀伤细胞的实验条件分析

摘要

cqvip:目的探讨影响Ficoll分离法富集脐带血(UCB)自然杀伤细胞(NK)的实验条件。方法在不同保存温度、复温时间、Ficoll密度和抗凝剂比例条件下,Ficoll法分离临床UCB,通过流式检测NK存活率、富集前后的回收率以及粒细胞清除率,评判富集效果。结果UCB在4、25、37℃下可保存至7h,随后UCB中NK存活率和富集回收率、粒细胞清除率随时间延长明显下降。对长时间保存的4℃脐血,可在不影响NK存活率情况下,通过复温37℃1h或适度增加Ficoll密度提升回收率。此外,血袋规格应与采集血量相匹配,否则较少血量会导致预留抗凝剂在UCB中的浓度变大,也会降低NK富集回收率。结论在保持UCB与抗凝剂正常比例情况下,临床UCB 37℃保存7h内进行Ficoll分离法富集NK可达到较好富集效果。