明胶-Ficoll法分离脐带血单个核细胞的方法学研究

摘要

目的 比较直接利用Ficoll一步法和明胶-Ficoll两步法分离脐带血MNCs的效果.方法 同一份脐带血分为两份,一份采用Ficoll直接分离MNCs,另一份先采用明胶沉淀红细胞后,再用Ficoll分离MNCs,比较两者的分离效率、细胞活力、细胞联苯胺染色阳性率、CD36和CD235a表达规律,以及CFU-E、BFU-E集落数.结果 一步法和二步法的分离效率及细胞活力无统计学差异;一步法收集的细胞联苯胺染色阳性率高于二步法;一步法和二步法分离所得的MNCs表达CD36+/CD235a-和CD36+/CD235a+的细胞数无显著差异,但前者表达CD36-/CD235a+的细胞数比后者多;培养7天时CFU-E集落数,二步法稍低于一步法,14天时BFU-E集落数,二步法显著多于一步法.结论 采用明胶-Ficoll二步法分离脐带血既不会增加MNCs的损失,还可更好地保留脐带血中比较早期的红系祖细胞.