牛卵母细胞玻璃化冷冻保存影响因素的研究

摘要

采用毛细玻璃管法对牛卵母细胞进行玻璃化冷冻保存,解冻后再进行体外受精(IVF)和早期胚胎的体外培养(IVC).在此技术的基础上,分别对冷冻前平衡时间、解冻处理、卵丘细胞层数以及卵母细胞所处的减数分裂阶段等影响卵母细胞冷冻保存的因素进行研究,以期筛选出适合牛卵母细胞冷冻保存的方法.结果发现,处于MⅡ期卵母细胞在10%二甲基亚砜(DMSO) +10%乙二醇(EG)液(VS1)中平衡1~3min,然后进行玻璃化冷冻保存.解冻时将卵母细胞先移入VS1液中处理15s,然后移入蔗糖稀释液中.另外发现,冷冻保存时部分卵丘细胞对卵母细胞有保护作用.而减数分裂阶段不影响解冻后卵母细胞形态正常率,但对胚胎发育率有严重影响.