蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较

摘要

采用海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法两种固定化方法,对来源于Klebsiella sp. LX3的蔗糖异构酶PalI的稳定性和可重复利用性进行研究.结果发现,海藻酸钠包埋法在海藻酸钠、CaCl2质量分数为1. 5% 、2%时,所得固定化酶的酶活最高,其最适反应温度为40℃,最适pH值为6;戊二醛交联法在(NH4)2SO4质量分数为90% ,戊二醛体积分数为2. 5%时得到的固定酶酶活最高,交联酶的最适反应温度为50℃,最适pH值为5.通过对酶的稳定性比较,两种方法酶稳定性都优于游离酶. 4℃保存20 d后游离酶的酶活降低到30% ,而戊二醛交联酶活性在95%以上,海藻酸钠固定化酶残余酶活仍在60%左右.戊二醛交联法固定酶活性优于海藻酸钠固定化酶,重复利用12次戊二醛交联酶,其残余酶活仍为80% .