PPARγ激动剂筛选细胞模型的构建及验证姜黄素为PPARγ天然激动剂的研究

摘要

目的 构建过氧化小体增殖剂激活型受体γ(peroxisome prolifterator-activated receptor,PPARγ)激动剂筛选细胞模型,验证姜黄素是不是PPARγ的天然激动剂,结合可能的PPARγ路径机制分析姜黄素在脑血管病治疗中的应用前景.方法利用电转染技术在U937(自身不表达PPARγ)细胞中共转染PPARγ表达质粒加报告质粒(PPARγ激动剂筛选细胞模型)及单独转染报告质粒；在不同组别的细胞中分别加入吡格列酮(PPARγ已知激动剂)和不同浓度的姜黄素(10μmol/L、20 μmol/L和30μmol/L)后测定报告质粒中虫荧光素酶表达活性.结果共转染细胞组加入吡格列酮20μmol/L后荧光强度较对照组荧光强度增加3.8倍,差异显著(P＜0.01),单独转染PPARγ报告质粒细胞组,加入吡格列酮未导致荧光增强；共转染细胞组加入不同浓度的姜黄素(10μmol/L、20μmol/L和30μmol/L)后,3种不同浓度的姜黄素较对照组荧光增加的倍数分别为1.52、2.38和2.97,各组别浓度的姜黄素和对照组比较均差异显著(P＜0.01)；其中低浓度姜黄素组明显低于中高浓度姜黄素组(P＜0.01),高浓度姜黄素组较中浓度姜黄素组高,但无差异显著性(P＞0.05)；单独转染PPARγ报告质粒细胞组加入不同浓度的姜黄素后均未导致荧光增强.结论将PPARγ表达质粒和报告质粒共转染U937细胞可作为PPARγ激动剂的细胞筛选模型,姜黄素是PPARγ的天然激动剂,姜黄素可能通过激活PPARγ而在脑血管病的防治中发挥作用.