基因枪法转化棉花胚性愈伤组织获得转基因植株

摘要

以川棉(Gossypium hirsutum)239胚性愈伤组织为受体,用基因枪轰击法导入外源基因,获得了经GUS组织染色和PCR扩增鉴定的转基因植株.以gus基因瞬时表达蓝点数为评价指标,考察了影响基因枪转化棉花胚性愈伤组织的几个因素,结果表明:使用碱裂解法提取和PEG法纯化的质粒DNA,优于试剂盒大量提取的DNA;当轰击压力为10.7 MPa时,轰击距离6或9 cm较好;轰前经1～2周培养的愈伤组织较佳.实验还表明,玉米的Ubi启动子在棉花胚性愈伤组织中有启动活性.轰击后直接用100 mg/L的卡那霉素进行筛选优于梯度筛选.