根癌农杆菌介导的抗除草剂转基因甘薯植株的获得

摘要

以甘薯(Ipomoea batatas(L.)Lam.)品种栗子香的胚性悬浮细胞为受体材料,用根癌农杆菌介导法,获得了表达bar基因的抗除草剂转基因甘薯植株.根癌农杆菌(Agrobacteriurn tumefaciens)菌株LBA4404携带有bar基因的双元载体pCAM-BIA3300,共计450个胚性细胞团用于遗传转化.在添加2mg/L 2,4-D、100mg/L Carb和0.5mg/L PPT(phosphinothricin)的固体MS培养基上选择培养8周后,得到了19个PPT抗性愈伤组织.将这19个抗性愈伤组织转移到添加1 mg/L ABA、100 mg/LCarb和0.5 mg/L PPT的固体MS培养基上,其中的10个抗性愈伤组织共再生出103株拟转基因植株.PCR分析表明,其中的69株为转基因植株.Southern blot分析表明,bar基因稳定地整合到转基因植株的基因组中.除草剂喷洒试验结果表明,转基因植株具有高度除草剂抗性.