根癌农杆菌介导Cry1Ac基因转化‘雪青’梨获得转基因植株

摘要

以‘雪青’梨叶片愈伤组织为外植体,经根癌农杆菌介导将CaMV35S启动子调控下的Cry1Ac基因导入‘雪青’梨。698块愈伤组织和231个Kanr芽与携带表达载体质粒pBX203的根癌农杆菌菌株LBA4404共培养3d后,转入含50mg.L-1Kan的筛选培养基培养30d,15d转接1次。结果表明,在MS+5mg.L-16-BA+0.1mg.L-1IAA筛选培养基中,Kanr芽率为34.24%,在1/2MS+2mg.L-1IBA+0.5mg.L-16-BA+500mg.L-1AC筛选培养基中,15.58%Kanr芽生根。共获得再生植株32株,经PCR和Southern-blot分析证明,其中4株的基因组已成功导入和整合Cry1Ac基因。