Tβ10基因过表达对离体鹿茸干细胞增殖、衰老和迁移的影响

摘要

胸腺素β10(thymosin beta 10,Tβ10)基因是肿瘤发生以及恶化分级的一个预判指标.研究发现,鹿(Cervidae)茸顶端的生长中心组织中Tβ10高度表达,而鹿茸却能快速生长(2 cm/d)不发生任何癌变.为了研究内源性鹿Tβ10基因过表达对鹿茸干细胞部分生物学特性的影响.本研究通过采集鹿生茸区骨膜(antlerogenic periosteum,AP)组织并对其进行了原代培养获得了高纯度AP细胞.通过克隆鹿Tβ10基因并构建慢病毒过表达载体,离体包装并收集慢病毒颗粒后感染AP细胞,qRT-PCR检测表明Tβ10基因表达量相对于对照上调了2.5倍,进而建立Tβ10过表达AP细胞系.四甲基偶氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT)实验表明,Tβ10基因过表达能极显著抑制AP细胞增殖(P＜0.01);β-半乳糖苷酶染色显示,Tβ10基因过表达极显著地促进了AP细胞的衰老(P＜0.01);细胞划痕实验表明,Tβ10基因过表达显著抑制人(Homo sapiens)脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的细胞迁移(P＜0.05).本研究为揭示鹿茸快速生长机制而不发生癌变以及深入研究鹿Tβ10基因在鹿茸快速生长中的功能提供了理论依据.