β—葡萄糖苷酶产生菌、发酵条件的优化、粗分离及其特性研究

摘要

通过筛选，获得了一株β-葡萄糖苷酶的高产菌株米曲霉F97。经过单因子及正交实验，确立了产酶的最适培养基配方；麸皮4%，KH2PO40.1%，蛋白胨0.1%，水杨苷0.05%，并按所优化的发酵产酶条件于30℃，150r/min，经88h培养，发酵液最终酶活达184.18u/mL。利用所选菌株，以麸皮为培养基，经8天培养，酶活达2592u/mg干曲。β-葡萄糖苷酶发酵液经35%和75%饱和度的硫酸铵分级沉淀，再经透析脱盐酶活回收率达68.91%，纯化倍数为3.27倍，其冷冻干燥制品酶活力单位为97.23u/mg，比活为189·11u/mg。该β-葡萄糖苷酶制品在离子强度为0.1M醋酸缓冲液中的酶活力最高，该酶的最适反应pH为4.8，最适反应温度为60℃，这与文献报道的以黑曲霉产的β-葡萄糖苷酶的特性相符。