三种提取人腰椎间盘纤维环总RNA效率方法比较

摘要

目的:通过比较利用不同方法抽提人腰椎间盘纤维环RNA的效果来评定抽提人腰椎间盘纤维环总RNA的有效的方法和步骤.方法:对60例腰椎间盘突出症患者在腰椎间盘摘除手术时切取摘除的椎间盘组织,60份标本分别用异硫氰酸胍法、Trizol法和膜结合柱分离法提取组织中的RNA,用紫外可见分光仪测定所得RNA的浓度和OD260/OD280的比值并分别记录,另外记录提取RNA所用的时间和OD比值大于1.60的阳性率以及平均每份标本所需的费用.结果:利用异硫氰酸胍法,平均耗时160 min,RNA平均浓度为95.44μg/μl,平均OD比值为1.62,阳性率58.3%;利用Trizol法提取总RNA,平均耗时105 min,RNA平均浓度为531.40μg/μl,平均OD比值1.40,阳性率18.5%;利用膜结合柱分离法提取标本总RNA,平均耗时41 min,RNA平均浓度为690.34 μg/μl,平均OD比值为1.83,阳性率100%.结论:膜结合柱分离法是提取人腰椎间盘高质量总RNA的有效方法.