中华眼镜蛇短链神经毒素cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要

利用RT-PCR 技术从中华眼镜蛇毒腺组织中成功地克隆了短链神经毒素cDNA.测序结果表明,该基因开放阅读框架编码83个氨基酸残基,其中21个为信号肽,成熟肽为62个氨基酸残基.该基因与GenBank 报道的相同物种的神经毒素基因有相当的同源性,不同物种之间的信号肽序列十分保守.将短链神经毒素cDNA再经PCR扩增除去信号肽序列,克隆到pT7ZZ表达质粒中,转化E. coli BL21(DE3)后,经IPTG诱导可高效表达分子量为23kDa②左右的融合蛋白.表达产物占菌体总蛋白的25%左右.