神经毒素

摘要： 神经毒素β-N-甲氨基-L-丙氨酸(β-N-methylamino-L-alanine,BMAA)主要来自淡水或海洋环境中的蓝藻和硅藻,在海洋生态系统中具有明显的生物放大作用,被认为是诱发阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease, AD)等多种神经退行性疾病的重要环境因子。近年, BMAA及其同分异构体2,4-二氨基丁酸(2,4-diaminobutyric acid, DAB)在我国及其他多个沿海国家和地区的贝类水产品中被普遍检出,潜在威胁消费者健康和海洋生态安全。但目前有关BMAA对海洋微藻的化学生态学作用尚不清楚。为此,通过向球等鞭金藻(Isochrysis galbana)培养基中分别添加不同浓度的BMAA及20种蛋白氨基酸,探究了BMAA单独及其与氨基酸联合作用96 h对球等鞭金藻比生长率和氨基酸含量的影响,并分析了微藻吸收外源BMAA的含量。结果表明,球等鞭金藻能吸收培养体系中的外源BMAA,吸收量与BMAA的添加浓度呈正相关,且进入细胞内的BMAA多半以溶解结合态形式存在;BMAA抑制批次培养的球等鞭金藻比生长率的96 h半效应浓度(96h-EC_(50))约为2μmol/L;与对照组相比,暴露于BMAA 96 h后球等鞭金藻细胞内酪氨酸、丙氨酸、丝氨酸等15种氨基酸的合成量明显降低;除脯氨酸、苏氨酸、甘氨酸外,其他17种氨基酸与BMAA联合暴露实验均增强了BMAA对球等鞭金藻比生长率的抑制效应,这可能与培养体系中的氨基酸促进了微藻吸收外源BMAA的能力有关。因此,海洋生态系统中BMAA毒素的化学生态学作用应引起人们的关注。有关BMAA抑制球等鞭金藻有丝分裂的分子机制有待进一步研究。

摘要： 一篇发表在国际期刊《Aging Cell》上的研究显示,仅2个月的生酮饮食就可以显著改善中年雌性小鼠的认知功能,同时降低循环犬尿氨酸水平(犬尿氨酸能够转化为神经毒素喹啉酸)。该研究为生酮饮食的性别特异性提供了重要证据。

摘要： 河豚文化是我国饮食文化史上不可忽视的精彩篇章,河豚体内含有的河豚毒素作为一种强效的非蛋白质神经毒素,主要是通过对电压门控钠通道的高度选择性阻断起作用。河豚毒素是最为致命的毒素之一,人体摄入极低剂量(1.5–2.0 mg)便会致死,但目前发现在远低于LD50水平给药时,河豚毒素展现出对神经性疼痛、癌症相关疼痛和毒品戒断等独特的治疗特性。本文简述河豚毒素结构的解析过程,并简要介绍了作用机制和未来在医疗上的应用前景。

摘要： 食用野生蘑菇日益流行导致蘑菇中毒事件的发生率不断增加。近年来,随着我国对蘑菇中毒事件广泛深入的调查,发现蘑菇中毒中导致神经精神型的事件越来越多。目前已经发现的有毒蘑菇中可导致神经中毒的毒素主要为毒蕈碱、异噁唑衍生物、裸盖菇素及鹿花菌素;该型蘑菇中毒不仅临床表现复杂多样,其毒理机制也比较复杂。目前国内对于该类中毒的毒理学机制研究较少,相关毒素尚未得到充分的研究。本文就神经精神型有毒蘑菇的种类、毒素分类、临床表现及中毒机理、诊断、治疗方面进行综述,发现导致神经精神型中毒的有毒蘑菇主要是鹅膏菌属、裸盖伞属及牛肝菌属类,临床表现依据蘑菇不同种类可表现不同的症状,目前尚无特效解毒剂,治疗以对症支持为主,大多数情况下,预后良好。此类毒蘑菇与食用菌的外观特征不明显,容易误食,亟需加强识别,并加强此类毒蘑菇毒素的致病机理研究,为该类毒蘑菇中毒的治疗提供基础数据与科学指导。本文还对目前研究热点与未来研究重点进行了展望。

摘要： 螳螂是多食性捕食者,可以说是昆虫里的“吃货”。它们的捕食对象小到各种节肢动物如毛毛虫,大到脊椎动物如蝾蛾。这些食物并非都是可口的,有些甚至是有剧毒的。例如,红色斑点蝾螈含有河豚毒素——自然界中发现的毒性最大的神经毒素之一,取食马利筋属植物的帝王斑蝶幼虫体内保留了这种植物中的强心苷——一种类固醇类毒剂。

摘要： 基于液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS),比较了两种亲水交互作用(hydrophilic liquid interaction chromatography column,HILIC)色谱柱和C18色谱柱分析扁玉螺(Neverita didyma)、脉红螺(Rapana venosa)、栉江珧(Atrina pectinata)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)等贝类样品中神经毒素β-N-甲氨基-L-丙氨酸(β-N-methylamino-L-alanine,BMAA)及其同分异构体化合物的性能.本研究采用Agilent 6430串联质谱对3批扁玉螺样品中的游离态、总溶解态和沉淀结合态BMAA毒素进行了分析,通过AB Sciex Qtrap 4500质谱分析了其他3种贝类样品的总溶解态BMAA.结果表明,4种贝类样品均含有BMAA和低浓度的2,4-二氨基丁酸(2,4-di-aminobutyric acid,DAB),且扁玉螺中的β-氨基-N-甲基丙氨酸(β-amino-N-methylalanine,BAMA)含量较低,其他3种贝类含有较高浓度的BAMA,但均未检出N-2-氨乙基甘氨酸[N-(2-aminoethyl)glycine,AEG].HILIC-MS/MS直接分析法获得的定量结果均高于AQC-柱前衍生法的定量结果,建议使用HILIC-MS/MS直接分析法对生物样品中的BMAA进行定性和定量分析,采用变迁离子119->88和119->44的信号强度辅助定性,并使用前者的色谱峰面积进行定量计算,条件允许时可采用AQC-柱前衍生法进行辅助定性分析.本研究可为生物样品中BMAA毒素的检测分析提供重要的方法学参考.

摘要： 2021-03-26封面图展示的是一只秃鹰抓着一条鲱鱼飞过阿肯色州怀特河。秃鹰及其他野生动物可能会死于一种名为空泡性髓鞘病的神经系统疾病。生长在入侵水生植物上的蓝藻菌会产生致病的神经毒素,通过食物链自下而上影响野生动物。毒素的生物合成依赖于溴化物,因此监测和管理植物宿主、溴化物水平及神经毒素对保护野生动物和人类健康至关重要。

摘要： 蛇毒可以伤人,也可以救人。它的主要毒性(活性)成分是蛋白质,根据作用部位及原理不同一般分为神经毒素、心脏毒素、凝血毒素、出血毒素等。研究人员分离和研究了多种毒蛇的毒液,目前基于蛇毒毒素也开发出了多种抗癌、镇痛、抗血栓的药物。

摘要： 英国研究人员最近的一项研究初步揭开了噪音危害健康的奥秘。他们发现,环境噪音能增强某些化学物质对大脑的损害,即噪音能与吸人体内的某些化学物质一起加强对神经系统的损害。损害大脑及周围神经系统的化学物质统称为神经毒素,它们既可以影响神经系统的功能,又可导致对大脑结构的损害。

摘要： 目的:制备和分离眼镜蛇神经毒素(Neurotoxin,NT)的荧光素单标记衍生物.rn 方法:以硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)作为衍生试剂,考察缓冲液pH、衍生反应温度、衍生反应时间、反应物比例等因素对NT单标记衍生反应的影响.利用半制备液相色谱分离、制备FITC-NT,经HPLC测定其纯度,通过热板法和醋酸扭体法评价其镇痛活性.rn 结果:优化衍生反应条件为:室温,缓冲液pH 8.4,衍生8h,FITC与NT比例1∶1.分离制备所得的FITC单标记的NT纯度为91.70％,具有良好的镇痛活性.rn 结论:该方法制备单标记的FITCNT纯度较高,且简便、快速、可靠.

摘要： 随着近年来水体内藻类频繁暴发,藻类产生的毒素逐渐成为关注的热点。蓝藻产生的毒素包括很多种类,主要有肝毒素(微囊藻毒素)、神经毒素、细胞毒素等。其中,神经毒素的毒性大、作用快,因此对人类、牲畜都有严重危害。本文就目前国内外有关藻类产生的神经毒素及其去除方法的相关研究进展进行了综述。

摘要： 目的：考察3种吸收促进剂对于多肽类大分子物质神经毒素(NT-I)鼻腔给药后脑内递药的作用。方法：运用125I-NT-I同位素标记法，以清醒大鼠为实验模犁，采用同步多处脑微透析技术，连续测定单用NT-I(1051xg/kg)以及NT-I合用冰片、薄荷和冰片/薄荷低共熔物人鼠鼻腔给药后分别在嗅球和小脑组织间液中NT-I的浓度。结果：单用NT-I鼻腔给药进入脑内非常有限。冰片/薄荷低共熔物组小脑和嗅球中AUC分别是2283.51±34.54和1358.58±32.56 min ng/ml，均低于单用冰片或薄荷组中在同一脑区的AUC。而两个脑区中低共熔组的达峰时间均较单独使用冰片和薄荷脑组的达峰时间短(P< 0.05)。结论：冰片、薄荷和冰片/薄荷低共熔物均有促进NT-I通过鼻黏膜吸收入脑的作用。冰片/薄荷脑低共熔物吸收促进作用较单独冰片和薄荷脑弱。但是，冰片/薄荷脑低共熔物可促进NT-I鼻腔给药后快速入脑。

摘要： 以聚氰基丙烯酸正丁酯（PBCA）为纳米材料，采用乳化聚合法制备神经毒素（1）PBCA纳米粒，考察其形态、粒径、ζ电位、包封率;并用脑微透析取样技术，评价经吐温-80包裹及未包裹的1PBCA纳米粒大鼠鼻腔给药后脑内递送的特征。结果：显示与未包裹的1PBCA纳米粒相比，吐温-80包裹的1PBCA纳米粒的Tmax增大，且Cmax和AUC0→∞升高一倍。表明包裹的1PBCA纳米粒延长达峰时间，且显著提高的脑内浓度。

摘要： 以聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)为纳米材料，采用乳化聚合法制备神经毒素(1)PBCA纳米粒，考察其形态、粒径、ζ电位、包封率；并用脑微透析取样技术，评价经吐温-80包裹及未包裹的1PBCA纳米粒大鼠鼻腔给药后脑内递送的特征。结果显示与未包裹的lPBCA纳米粒相比，吐温-80包裹的1PBCA纳米粒的Tmax增大，且Cmax和AUCO-+∞升高一倍。表明包裹的1PBcA纳米粒延长达峰时间，且显著提高1的脑内浓度。

摘要： 蛇毒的分类有2700种,12科400属,致命性毒蛇有300多种;中国的有200多种蛇,隶9科62属;其中,毒蛇近57种,剧毒的毒蛇20种;中国常见致命性毒蛇眼镜蛇科(如眼镜蛇、眼镜王蛇、金环蛇和银环蛇)蝰科(如蝰蛇)蝮亚科(尖吻蝮蛇、烙铁头蛇、竹叶青蛇、蝮蛇等)游蛇科:红脖游蛇海蛇科:海蛇蛇毒的医学分类血液毒神经毒细胞毒混合毒素第一部分:误区1对蛇毒了解欠缺1过于片面单纯把毒素归类结果:单纯针对一种毒素,处置不当2不重视混合毒素作用,主次不分结果:处置不当。常见蛇伤的基本处置，蛇毒的医学分类，神经毒素。

摘要： 目的:探究中华眼镜蛇毒NNAV及其单一组分神经毒素NTX是否能够抑制皮肤移植所引起的急性免疫排斥反应,并探究其作用机制.rn 方法:1.给药方式：口服灌胃给药,中华眼镜蛇毒(20-80μg/kg),神经毒素(10-40μg/kg),阳性药雷公藤多苷片(15mg/kg)；2.建立大鼠皮肤移植模型：以雌性SD大鼠为供体,雄性Wistar大鼠为受体,建立大鼠背部皮肤移植模型；3.病理检查：取各组移植皮片，脾脏，胸腺固定包埋，HE染色观察病理变化；4.细胞因子检测；5.T淋巴细胞增殖；6.T淋巴细胞分化；7.混合淋巴细胞培养：以丝裂霉素处理过的SD大鼠脾淋巴细胞为刺激细胞，Wistar大鼠脾淋巴细胞为反应细胞，进行混合淋巴细胞培养；8.T细胞增殖与细胞周期：正常大鼠NTX给药21天，CFSE标记脾淋巴细胞，ConA刺激培养72h，流式检测细胞增殖情况;ConA刺激脾淋巴细胞培养48h，PI染色，流式检测细胞周期状况。rn 结果:1.NNAV及NTX可延缓移植皮片脱落，减轻移植部位炎症反应，促进植床表皮恢复生长；2.NNAV及NTX可显著抑制Th1细胞因子IL-2，IFN-γ的表达；3.NNAV及NTX可逆转由移植排斥引起的T淋巴细胞增殖；4.NTX可通过抑制CD4+T细胞的比例，来抑制由排斥引起的CD4+/CD8+比值的升高；5.NTX体外给药可在非毒性剂量内抑制T淋巴细胞增殖及混和淋巴细胞中的淋巴细胞增殖；6.正常大鼠NTX在体给药21天后可通过将细胞周期阻滞在G0期抑制T淋巴细胞增殖。rn 结论：皮肤移植引起的急性排斥反应主要是由T淋巴细胞所介导的，CD8+细胞毒性T细胞直接作用于移植物，破坏移植物，CD4+辅助性T细胞通过分泌细胞因子或特异性抗原抗体反应参与排斥进程。本研究实验结果表明NNAV及NTX可通过抑制T细胞增殖，抑制IL-2和IFN-γ表达上调，减少移植部位炎症细胞浸润，抑制CD4+/CD8+比值升高来抑制排斥反应，延缓移植皮片的脱落。体外研究表明神经毒素在非细胞毒性剂量内可抑制淋巴细胞增殖。正常大鼠NTX长期给药可通过将细胞周期阻滞在G0期而非毒性作用来抑制T细胞增殖。现有临床免疫抑制剂通常伴有脏器损伤和诱发肿瘤的副作用，NNAV及NTX长期给药并未产生不良反应，很有潜力成为一种安全的免疫抑制剂，并且其具有确切的抗炎作用，可更好地抑制免疫排斥反应。

摘要： 河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)是非蛋白、低分子量、高活性的神经毒素,化学结构具有多羟基氢化5,6-苯吡啶母核结构,是一种氨基全羟基喹唑啉的生物碱.河豚鱼肝中含有较多的河豚毒素,其水溶性强,极性大,反相C18柱上几乎不保留,需采用离子对色谱进行分离,并且样品处理方法繁锁,本文建立河豚鱼肝中河豚毒素(TTX)的亲水液相色谱三重四极杆质谱联用(LC-MS/MS)定量检测方法,简化样品处理方法,方法灵敏,结果可靠.

摘要： 本文利用外源表达的方法表达眼镜蛇C7基因，为眼镜蛇蛇毒在医学上的应用奠定基础。直接用广西眼镜蛇基因组DNA，利用拼接PCR的方法能有效拼接两个外显子序列，能成功获得广西眼镜蛇CT基因成熟肽序列，说明拼接PCR的方法能够用于成熟肽完整序列的得到和扩增;通过序列比对发现，广西眼镜蛇CTS因成熟肽序列具有较高的保守性;pET30a(+）-CT载体可在大肠杆菌BL21中表达。

摘要： β-N-甲氨基-L丙氨酸(BMAA)是一种具有神经毒性的非蛋白质氨基酸，研究发现其与神经退行性疾病有关。其最早发现于太平洋关岛，在死于ALSIPDC(肌萎缩性脊髓侧索硬化症/帕金森综合症)病人的脑组织切片中检测到BMAA存在，并发现BMAA在环境中有生物放大效应，在与苏铁植物共生的念珠藻细胞提取物中检测到BMAA，随后在关岛当地果蝠(以苏铁种子为食物)体内也检测到BMAA，而岛上居民以果蝠为传统食物，BMAA随食物链的放大，浓度被放大了1万倍以上。

摘要： 本发明申请鉴于眼镜蛇蛇毒成分的复杂性和科博肽为碱性多肽、分子量大约7000道尔顿左右、相对耐热耐酸碱等理化性质，综合考虑各种层析柱填料的分离机理、应用特点、长期使用的稳定性、成本的可控性以及提取目标的达成，提供一种高纯度眼镜蛇神经毒素的提取方法，该方法工艺稳定、层析填料易得、综合成本低、操作条件适应性好、神经毒素的收率高。本发明申请进一步提供由上述方法制备得到的高纯度科博肽，用它制成的注射用科博肽制剂中与治疗作用无关的杂质少、治疗作用起效快、疗效稳定。本发明申请还提供几种以高纯度科博肽为有效成分，配方制成制剂所必要的制剂辅料的药物组合物及不同的剂型，适合口服、口腔吸收、直肠给药的科博肽制剂。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇神经毒素蛋白的融和可溶表达、重组神经毒素的酸裂解释放及其生产纯化方法，包括天然毒素的理化性质及序列的测定、神经毒素基因的克隆和以融合方式的可溶表达、重组蛋白的融合位点的改造以及重组毒素的酸裂解释放以及纯化；采用本发明所述的用基因工程的方法表达生产重组神经毒素可获得大量可用于临床的重组神经毒素，可以使毒素的来源不受自然条件的制约。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇蛇毒神经毒素和细胞毒素的分离纯化方法，可同时分离眼镜蛇毒神经毒素和细胞毒素，提高了眼镜蛇毒的综合利用效率。本发明先使用丙酮处理眼镜蛇蛇毒原液，以除去蛇毒原液中的脂溶性成分，以酸调节蛇毒丙酮粉水溶液的pH，离心除去蛇毒中的中酸性蛋白和多肽，再以PAA特异吸附并沉淀蛇毒中的碱性蛋白和碱性多肽，离心分离PAA-碱性蛋白/多肽复合物，除去水溶性成分；利用pH变化使PAA-碱性蛋白/多肽解吸附，用氯化钙除去PAA；以Sephadex G-50(超细颗粒)凝胶柱分离纯化眼镜蛇毒神经毒素和细胞毒素，产品含盐量低，可直接冷冻干燥。

摘要： 本发明通过构建平颏海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文库和DNA测序，得到三个编码短链神经毒素的基因，分别称为sn12、sn36和sn160。采用PCR方法改造并扩增该三个cDNA，克隆到表达载体PETTRX上，以BL21-DE3为表达宿主，经IPTG诱导，三种神经毒素基因在大肠杆菌中都得到高效的可溶性融合表达。短链神经毒素镇痛作用实验表明，sn12、sn36和sn160均能明显提高小鼠的痛阈值。

摘要： 本发明涉及眼镜蛇科蛇突触后神经毒素、心脏毒素、细胞毒素、磷脂酶A2及粗毒在抗病毒感染上的应用。呼吸道由于它对外界开放式的解剖结构而容易受到病毒的侵袭和感染，病毒性流感和肺炎是日常生活中比较常见的病例；除此以外，乙肝病毒、艾滋病毒也会通过多种途径感染人类致病。病毒性引起的呼吸道疾病目前的治疗手段无论是疫苗还是药物效果都不太理想，病毒性肝炎和艾滋病的治疗效果也有待进一步提高，故开发一种对病毒具有广谱抑制能力而副作用小的产品已成为一种临床急需。眼镜蛇科蛇突触后神经毒素、心脏毒素、细胞毒素、磷脂酶A2及粗毒都显示出其在抗病毒感染上的有效性，有可能成为新的抗病毒产品的候选者。

摘要： 本文中提供了在细菌物种屎肠球菌(Enterococcus faecium)中鉴定的新的肉毒梭菌神经毒素(BoNT)同源物(BoNT/EN)。还提供了包含来自BoNT/EN和其他BoNT的结构域的BoNT/EN变体和嵌合毒素。本文中还提供了产生BoNT/EN的方法及其用途(例如在治疗应用中)。

摘要： 本发明公开了一种基于神经毒素促进电子传递效应的沙蚕毒素类杀虫剂的检测方法，包括以下步骤：包括以下步骤：步骤一，将杀虫磺在碱性条件下水解，脱去两边的苯磺酸基团形成NRT的一氧化物，用三(2‑羧乙基)膦(TCEP)还原NRT一氧化物的二硫键产生具有2个自由巯基的NRT；步骤二，将沉积金处理的玻碳电极置于NRT溶液中，使杀虫磺水解产生的NRT通过Au‑S键组装在纳米金修饰的玻碳电极表面；步骤三，将组装了NRT的电极置于含有1mmol/L KCl的铁氰化钾溶液中进行电化学测定。本发明的有益效果：具高灵敏度有、生物识别系统选择性高的特点。

摘要： 本发明申请鉴于眼镜蛇蛇毒成分的复杂性和科博肽为碱性多肽、分子量大约7000道尔顿左右、相对耐热耐酸碱等理化性质，综合考虑各种层析柱填料的分离机理、应用特点、长期使用的稳定性、成本的可控性以及提取目标的达成，提供一种高纯度眼镜蛇神经毒素的提取方法，该方法工艺稳定、层析填料易得、综合成本低、操作条件适应性好、神经毒素的收率高。本发明申请进一步提供由上述方法制备得到的高纯度科博肽，用它制成的注射用科博肽制剂中与治疗作用无关的杂质少、治疗作用起效快、疗效稳定。本发明申请还提供几种以高纯度科博肽为有效成分，配方制成制剂所必要的制剂辅料的药物组合物及不同的剂型，适合口服、口腔吸收、直肠给药的科博肽制剂。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇蛇毒神经毒素和细胞毒素的分离纯化方法，可同时分离眼镜蛇毒神经毒素和细胞毒素，提高了眼镜蛇毒的综合利用效率。本发明先使用丙酮处理眼镜蛇蛇毒原液，以除去蛇毒原液中的脂溶性成分，以酸调节蛇毒丙酮粉水溶液的pH，离心除去蛇毒中的中酸性蛋白和多肽，再以PAA特异吸附并沉淀蛇毒中的碱性蛋白和碱性多肽，离心分离PAA－碱性蛋白/多肽复合物，除去水溶性成分；利用pH变化使PAA－碱性蛋白/多肽解吸附，用氯化钙除去PAA；以Sephadex G－50(超细颗粒)凝胶柱分离纯化眼镜蛇毒神经毒素和细胞毒素，产品含盐量低，可直接冷冻干燥。

摘要： 本发明公开了一种眼镜蛇神经毒素蛋白的融和可溶表达、重组神经毒素的酸裂解释放及其生产纯化方法，包括天然毒素的理化性质及序列的测定、神经毒素基因的克隆和以融合方式的可溶表达、重组蛋白的融合位点的改造以及重组毒素的酸裂解释放以及纯化；采用本发明所述的用基因工程的方法表达生产重组神经毒素可获得大量可用于临床的重组神经毒素，可以使毒素的来源不受自然条件的制约。