下调FMNL3基因表达对SW620细胞体外增殖及侵袭能力的影响

摘要

目的 探讨下调FMNL3基因表达对SW620细胞体外增殖和侵袭能力的影响.方法 用脂质体转染法将FMNL3干扰质粒pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA1(shRNA1组)和pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-shRNA2(shRNA2组)转染结直肠癌SW620细胞,以无关序列(pcDNA3.1-EGFP-FMNL3-scramble)转染为阴性对照(scramble组),以未转染质粒的SW620为正常对照(NC组).荧光显微镜下评估转染效率,实时荧光定量PCR法检测FMNL3基因的干扰效率,MTT实验检测FMNL3基因沉默前后SW620细胞生长和增殖情况,Transwell小室法检测干扰前后细胞的体外侵袭能力变化.结果 各组转染效率分别为scramble组 (74.35±5.93)%,shRNA1组(72.33±7.65)%,shRNA2组(73.17±4.32)%,差异无统计学意义(P>0.05);与NC组相比,转染48 h各组细胞中FMNL3 mRNA表达水平分别为scramble 组(93.35±6.33)%,shRNA1组(16.44±4.37)%,shRNA2组(18.51±5.16)%,两个shRNA组细胞FMNL3 mRNA表达水平显著下调,其中shRNA1组下调最多,干扰效率最高;与NC组和scramble组细胞相比,shRNA1和shRNA2组细胞48 h和72 h体外增殖活力明显下降(均P<0.05),其48 h穿出Transwell小室人工基底膜的细胞数明显减少(P<0.01).结论 下调FMNL3基因表达后,结直肠癌SW620细胞的体外增殖和体外侵袭能力均明显下降,FMNL3可能正向调控结直肠癌细胞的增殖和侵袭.