下调CDKL1基因表达水平对食管癌细胞增殖和侵袭能力的影响

摘要

目的 探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白样激酶1(CDKL1)基因在食管癌癌组织与癌旁组织中的表达情况,及其与食管癌患者临床病理参数的相关性,分析下调CDKL1基因表达水平对食管癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫组化技术检测50例食管癌患者的癌组织、相应的癌旁组织中CDKL1 mRNA和蛋白的表达水平.采用小干扰RNA(siRNA)技术下调CDKL1的表达,使用qRT-PCR检测CDKL1基因沉默的效率.采用CCK-8、平板克隆和transwell实验检测si-CDKL1组和对照组中食管癌细胞增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力的不同.结果 (1)CDKL1 mRNA在食管癌癌组织中的表达水平较癌旁组织中的表达水平高(P<0,05).(2)CDKL1蛋白在食管癌组织中的免疫组化评分高于癌旁组织(P<0,05).(3)肿瘤分期Ⅲ～Ⅳ期食管癌患者的CDKL1 mRNA表达率高于肿瘤分期0～Ⅱ期者(P<0,05).淋巴结转移的食管癌患者的CDKL1 mRNA表达率高于淋巴结未转移者(P<0,05).(4)CDKL1 mRNA在食管癌细胞系TE1、TE7、EC1和EC109的表达水平均高于在食管正常上皮细胞系Het-1A中的表达水平(P<0,05).与对照组比较,si-CDKL1组TE1细胞上CDKL1 mRNA表达水平下调(P<0,05).(5)si-CDKL1组食管癌细胞增殖能力弱于对照组(P<0,05).(6)镜下结果显示,si-CDKL1组食管癌细胞克隆形成能力弱于对照组.si-CDKL1组食管癌细胞克隆形成的数量少于对照组(P<0,05).(7)镜下观察24 h侵袭结果显示,si-CDKL1组食管癌细胞侵袭能力弱于对照组.si-CDKL1组食管癌细胞侵袭数量少于对照组(P<0,05).结论 CDKL1能够促进食管癌细胞的增殖、克隆形成及侵袭,促进食管癌的发生、进展,可能作为治疗食管癌的一种潜在分子靶点.