人参皂苷Rd高产突变株Paecilomyces bainier sp229-7的生长特性和生物转化

摘要

目的 通过研究突变株拟青霉菌sp229-7(Paecilomyces bainier sp229-7)的生长及转化底物情况,探讨突变株转化三七茎叶总皂苷的高效性.方法 在不同条件下,运用摇瓶转化法考查菌株生长和转化底物特性;分别采用静息态细胞、胞外酶以及粗酶液,测定其对底物转化情况.结果 菌体12～48 h之间生长最旺盛,36 h加入底物转化率最高,加入底物后72 h转化基本结束,转化产物只有人参皂苷Rd,底物投料量至少可以达到20 mg/mL,克分子转化率达80%以上,转化温度27 ℃～32 ℃之间最佳.静息态细胞、胞外酶以及粗酶液都可以将人参皂苷Rb1转化为人参皂苷Rd.结论 与文献报道相比,Paecilomyces bainier sp229-7突变株具有良好的底物耐受性和专一性,快速生长的后期是底物投料的最佳时机,Rb1 转化为Rd 的时间缩短为3 d,投料量至少增加20倍,显著提高了转化效率,可望应用于工业生产.突变株的高转化效率可能与转化酶由细胞内产生并部分分泌到胞外有关,增加了酶与底物接触机会,避免了产物在胞内过量积累.