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联苯胺预试验处理血痕后样本DNA定量的研究

     

摘要

目的 探讨联苯胺血痕预试验处理后样本DNA含量的变化及对STR分型检测的影响.方法 选取10名无关个体EDTA抗凝血液制成滤纸血痕,保存干燥时间分0.5h、1h、3h、6h、12h、24h六个实验组,并采用磁珠提取法、QIAcube DNA提取纯化法、chelex-100提取法提取样本DNA,应用RT-PCR定量技术检测样本DNA含量,同时应用PCR-STR技术和Idfiler-plus试剂盒检测相应样本STR分型.结果 联苯胺血痕预试验后处理样本,随保存时间的延长,其样本DNA含量显示逐渐降低的趋势.回归线性对数分析显示,磁珠提取法:Y=-0.4087ln(x)+0.7044 R2=0.7633;QIAcube DNA提取纯化法:Y=-0.2393ln(x) +0.4764 R2=0.8715;chelex-100提取法:Y=-0.11781n(x)+0.2302 R2=0.9571.不同DNA提取方法对同一保存时间的联苯胺血痕预试验试剂处理样本DNA含量间差异有极显著性,P<0.01.结论 联苯胺血痕预试验后对后续STR分型影响较大,联苯胺血痕预实验后的血痕不能继续进行STR分型检测.

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