不同培养条件对大肠杆菌工程菌产β-胡萝卜素的影响

摘要

将克隆了噬夏孢欧文氏菌类胡萝卜素合成相关基因crtE、crtB、crtI的重组质粒pET-15bcrtEIB和crtY的重组质粒pACYC-184crtY共转化E.coliBL21(DE3)构建工程菌.研究了碳源、氮源、金属离子、培养温度、光照、pH值、诱导时间等参数对工程菌生长及色素累积的影响,确定了合适的培养条件:培养基为改良LB培养基(蛋白胨10g/L、酵母提取物10g/L、可溶性淀粉5g/L、MgCl20.04g/L、FeCl3 0.01g/L、NaCI 10g/L,pH5.8),光照,起始培养温度为37℃,培养至OD600为0.6时加入IPTG至终浓度为0.5mmol/L,诱导温度降至28℃:诱导时间为12h.发酵完成后工程菌的生物量为7.32g dw/L,β-胡萝卜素的最高含量可达5.11mg/g dw.