对羟基联苯法定量测定发酵液中的乳酸

摘要

对传统的对羟基联苯法进行了优化,应用于定量测定发酵液中的乳酸.首先对发酵液进行适当预处理,去掉蛋白质和葡萄糖,再利用正交设计对影响显色的几个重要因素进行了优化,结果表明,最佳测定波长为565nm;最佳显色条件为氢氧化钙0.05g,20%硫酸铜0.8ml,浓硫酸6ml,0.5%对羟基联苯0.125ml,静置时间15min,加热显色时间5min.标准曲线回归方程为A=0.0189C-0.0808(n=8),r=0.9989.在15～50μg/ml范围内呈良好线性关系.平均回收率为102.4%.显色稳定保持2h以上,RSD为2.6%(n=12).该方法解决了传统对羟基联苯法显色时间长、准确度不高等问题,适合于发酵液中乳酸含量的测定.