His-N2蛋白体外排除抑制大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液蛋白的研究

摘要

以植物乳杆菌KLDS1.0320候选表面黏附蛋白NP 785232 N端前两个结构域组成的融合表达蛋白为研究对象,采用体外模拟肠道环境的方法研究其对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的排除抑制作用.对猪肠黏液进行固定,加入His-N2融合表达蛋白37℃孵育1h,再加入大肠杆菌DH5α菌悬液37℃孵育1h,洗去未黏附的菌体,之后用1％Triton X-100进行裂解,将裂解液涂布LB琼脂平板以进行菌落计数.结果表明:pH值为6.6时,相对于缓冲液阴性对照组,His-N2蛋白对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的抑制率为(50.37±3.66)％,相对于BSA蛋白对照组的抑制率为(38.33±4.55)％;pH值为7.5时,相对于缓冲液阴性对照组,His-N2蛋白对大肠杆菌DH5α黏附猪肠黏液的抑制率为(42.18±3.44)％,相对于BSA蛋白对照组的抑制率为(34.48±3.90)％.在体外模拟条件下,由植物乳杆菌KLDS1.0320的候选表面黏附蛋白NP_785232N端前两个结构域组成的His-N2蛋白能排除抑制大肠杆菌DH5α对猪肠黏液蛋白的黏附.