重组牛乳铁蛋白功能片段在毕赤酵母中的表达及高密度发酵

摘要

该研究合成了密码子优化后的牛乳铁蛋白功能片段(bovine lactoferrin functional fragment,BlfFf),转入毕赤酵母GS115中重组表达并筛选抗性菌株,通过镍亲和层析纯化BlfFf,以Western Blot、液质联用和ELISA对重组蛋白进行鉴定及检测.比较了5L发酵罐生产中3种不同高密度发酵培养基对BlfFf生产的影响.结果 表明:重组转化子正确表达了BlfFf.镍亲和层析中,150 mmol/L咪唑洗脱可得到电泳纯37 kDa的目标条带.在3种高密度发酵培养基中,RDM最优,诱导48 h,菌体湿细胞密度达到297 g/L,BlfFf表达量为38.1 mg/L.