perR基因的敲除对丙酮丁醇梭菌摇瓶发酵的影响

摘要

为了提高丙酮丁醇梭菌对分子氧的耐受能力,降低厌氧发酵环境,构建了超氧化物阻遏蛋白(PERR)基因敲除的工程菌株.应用Ⅱ组内含子敲除系统,PCR克隆perR-Targetron基因与载体连接构建敲除质粒pSY-perR,电转化丙酮丁醇梭菌C.acetobutylicum ATCC 824,PCR筛选验证获得突变菌株C.acetobutylicum ATCC 824-△perR,采用摇瓶发酵对其突变菌株进行发酵性能研究.结果表明:静止状态发酵丁醇C.acetobutylicum ATCC824-AperR比C.acetobutylicum ATCC 824丁醇产量提高7.89％,摇床转速为200 r/min时,C.acetobutylicum ATCC824-△perR的丁醇产量是C.acetobutylicum ATCC 824的3.34倍.研究表明,通过Ⅱ组内含子敲除系统,构建的C.acetobutylicum ATCC824-△perR在发酵过程中降低了氧分子的伤害,不需要严格的厌氧条件,从而降低发酵成本.