大麦β-淀粉酶基因在大肠杆菌中的异源表达

摘要

大麦来源的β-淀粉酶具有稳定性高和工业应用效果好的优点,被广泛应用于食品、酿造以及粮食加工,但是其制备成本高,价格较昂贵.该研究使用大肠杆菌异源表达大麦来源的β-淀粉酶.首先通过基因合成技术获得密码子优化的大麦来源的β-淀粉酶基因,将该基因通过质粒pET28a(+)在大肠杆菌BL21(DE3)中过量表达获得重组β-淀粉酶.其次,对重组表达的β-淀粉酶和大麦中直接提取的β-淀粉酶进行酶学性质比较分析.结果表明,重组表达的β-淀粉酶其分子质量大小与大麦中β-淀粉酶一致,即59 kDa,重组的β-淀粉酶比酶活由大麦来源的588 U/mg降为285.5 U/mg,最适作用温度降低了10℃,最适pH保持一致.所以,大麦β-淀粉酶能够在细菌中高效表达,但是其酶学性质发生较大改变.