犬CD19的表达及单克隆抗体制备

摘要

为研究犬CD19(cluster of differentiation 19,CD19)生物学功能及犬B细胞淋巴瘤的诊断与治疗方法,本研究以纯化的CHO细胞表达的融合蛋白CD19-mFc作为免疫原免疫BALB/c小鼠,以293细胞表达的融合蛋白CD19-HSA作为筛选抗原,将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过间接ELISA方法筛选得到10株可持续稳定分泌针对犬CD19特异性单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞。抗体亚类鉴定表明,10株mAb均为IgG1型,轻链均为κappa链。IFA结果显示,10株mAb均可识别过表达犬CD19的293T细胞。IHC结果显示仅1株mAb可特异性识别犬脾、扁桃体等淋巴组织中淋巴滤泡及髓索中的B细胞。结果表明,本研究制备的犬CD19 mAb为后续犬CD19分子的功能研究及犬类淋巴瘤诊断和治疗奠定了基础。