马面鱼皮ACE抑制肽的制备、分离纯化及稳定性

摘要

为实现马面鱼皮的高值化利用,优化其胶原蛋白制备ACE抑制肽的酶解条件,通过超滤、凝胶色谱、高效液相及UPLC-MS等方法分离、纯化及分析ACE抑制肽。探讨pH值、温度及体外模拟胃肠消化对分离制备多肽的ACE抑制活性的影响。结果表明:利用复合酶解法可制备高活性ACE抑制肽,即在蛋白酶N“天野”2G用量1200 U/g,胰蛋白酶用量2400 U/g,底物质量分数4%,温度40℃,pH 8的条件下酶解4 h,酶解产物ACE抑制率达74.3%。经超滤、凝胶分离制备3个高活性级分(a_(1),a_(2),a_(3)),稳定性研究表明这3个级分在酸性和弱碱性条件下能保持较高活性,热稳定性好,经胃肠模拟消化后仍能保持较高的ACE抑制活性,其中级分a1的ACE抑制活性和稳定性最佳。HPLC及UPLC-MS分析表明,级分a1纯度较高,其氨基酸序列可能为Gly-Val-Ala或Ala-Val-Gly。本研究结果为马面鱼皮的精深加工及新型ACE抑制剂的开发提供一定的理论依据。