渗压震扰法释放Aeromonas sp.2016菌株外周间质中几丁质酶的研究

摘要

气单胞菌Aeromonas sp.2016菌株能产生多种几丁质酶,其中的胞外酶C可能聚集于细胞外周胞质。为了避免破碎菌体而产生过多的杂蛋白,探索了用渗压震扰法(osmotic shock)来释放这部分酶。主要步骤是:先将菌体悬浮在20%蔗糖-0.03mol/L Tris-HCI(pH8.0)高渗透压的溶液中,再快速转移到纯水低渗透压溶液中,产生瞬间渗压震荡,释放细胞外周胞质中的酶。结果表明,通过渗压震扰法释放出的酶纯度最高,比活力达到142.79U/g,比培养液上清液的54.46U/g和菌体破碎样品的14.66U/g分别高1.6倍和8.7倍,可用于纯化目的蛋白。