Aeromonas sp.SUWA-9菌株几丁质酶基因及土壤细菌红色基因的克隆分析

摘要

气单孢菌Aeromonassp.SUWA-9菌株是从日本国长野县SuwaLake的湖水中分离到的细菌。该菌株可产生多种活性很强的胞内几丁质酶。利用限制性核酸内切酶Sau3AI将该菌的基因组DNA部分酶切成各种大小的DNA片段，经蔗糖密度梯度离心后收集2-10Kb的DNA片段，再与经BamHI/BAP处理的载体质粒pUC118连接，转入大肠杆菌中表达，得到了8株阳性重组菌，编号clone-1，2，3，4，5，6，8，9。经底物反应和限制性内切酶图谱分析，确定其中的clone-1，4，5，6，8含有相同的几丁质酶基因；而clone-2，3，5，9四株重组菌则含有不同的几丁质酶基因。SDS-PAGE活性染色显示这些酶所作用的底物有所不同，既有内切型酶，也有外切型酶，分子量从64KD-83KD不等。用不同的限制性核酸内切酶对clone-5重组质粒进行酶切，构建了它的酶切图谱。根据clone-5质粒的酶切图谱，利用多种核酸内切酶进行消化，再用连接酶进行连接，构建了一系列的重组亚克隆质粒。

目录

第一部分 文献综述

第二部分 前言

第三部分 从Aeromonas SUWA-9菌株中克隆几丁质酶基因

第四部分 从土壤细菌中克隆红色基因

第五部分 小结

参考文献

附录： 撰写及发表的论文

致谢