用HPLC-MS/MS法检测大鼠乳腺微透析液中环磷酰胺的浓度

摘要

目的：建立HPLC-MS/MS法检测大鼠乳腺微透析液中环磷酰胺的浓度。方法：采用Cosmosil-C18色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相：A相为0.1%甲酸溶液,B相为乙腈,0-1min A∶B=70∶30,1-1.5min A∶B=60∶40,1.5-5.5min A∶B=40∶60,5.5-8min A∶B=70∶30,梯度洗脱8min,流速为1ml/min。正离子多反应检测（MRM）方式进行检测,监测离子对：环磷酰胺m/z261.3→140.1,内标安替比林m/z 189.2→104.0。结果：环磷酰胺的线性范围为0.05-10μg/ml,最低定量限为0.05μg/ml。日间和日内RSD均〈15%,准确度和稳定性实验结果均符合生物样品的测定要求。结论：本方法灵敏度高,操作简便,适用于微透析样品中环磷酰胺的浓度测定。