人表皮丝集蛋白的纯化和鉴定

摘要

丝集蛋白是类风湿关节炎相关的自身抗体。利用乙醇沉淀、HiPrep 16/10 QXL凝胶结合高效液相色谱离子交换层析(HPLC)纯化人表皮丝集蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳确定相对分子质量,并采用免疫印迹法(Western blot)、用抗丝集蛋白单克隆抗体进行鉴定。所获得的表皮细胞丝集蛋白相对分子质量44 000,纯度达到电泳纯,经免疫印迹法鉴定,抗原性良好。表明利用乙醇沉淀法结合HPLC系统,可高效、简便、快速地分离和纯化人表皮丝集蛋白。