抗人Endoglin胞外段单链抗体的可溶性表达和鉴定

摘要

目的用E.coli HB 2151表达抗人Endoglin胞外段单链可变区片段(single chain variable fragment,scFv),并鉴定其抗原结合活性,为卵巢癌的体内诊断和治疗研究提供靶向载体分子。方法用呈现scFv抗体的重组噬菌体感染E.coli HB 2151进行抗体的可溶性表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定可溶性scFv的表达,竞争性ELISA检测可溶性scFv的抗原结合活性。结果抗人Endoglin胞外段scFv得到了可溶性表达,表达产物主要位于周质腔中,其分子量约为29kD。该周质提取物中scFv能与抗Endoglin单克隆抗体竞争性结合同一抗原表位,且竞争作用随scFv浓度增加而加强。结论用E.coliHB2151成功表达了具有抗原结合活性的抗人Endoglin胞外段scFv,为其应用研究奠定了基础。