1-磷酸鞘氨醇对人胎儿肺成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白表达的作用

摘要

目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)通过1-磷酸鞘氨醇受体2(S1P2)及RhoA/Rho激酶通路对人胎儿肺成纤维细胞(HFL-1)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的作用。方法:本研究为实验研究。培养14~19代HFL-1。应用蛋白质印迹法分别检测不同浓度(10 -7 mol/L、10 -6 mol/L、10 -5 mol/L)S1P刺激下HFL-1中α-SMA的表达，10 -6 mol/L S1P及10 -6 mol/L S1P2拮抗剂JTE-013刺激下HFL-1中α-SMA、RhoA的表达，10 μg/L RhoA抑制剂C3胞外酶、10 -5 mol/L Rho激酶抑制剂Y27632、10 -6 mol/L S1P刺激下HIF-1中α-SMA的表达。 结果:S1P 10 -6 mol/L组、S1P 10 -5 mol/L组α-SMA的相对表达量0.641(0.591，0.747)、0.662(0.633，0.810)较空白对照组0.116(0.089，0.456)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P组α-SMA的相对表达量0.907(0.466，1.629)较空白对照组0.540(0.210，0.807)、JTE-013组0.296(0.182，0.598)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P10 -6 mol/L 5 min组RhoA的相对表达量0.931(0.660，0.977)较S1P 10 -6 mol/L 0 min组0.060(0.023，0.061)升高；S1P 10 -6 mol/L 10 min组RhoA的相对表达量0.086(0.016，0.097)较S1P 10 -6 mol/L 5 min组RhoA的相对表达量0.931(0.660，0.977)降低；S1P 10 -6 mol/L组RhoA的相对表达量2.221(2.063，3.061)较空白对照组0.833(0.092，1.393)、JTE-013 10 -6 mol/L组0.619(0.145，0.967)、JTE-013 10 -6 mol/L+S1P 10 -6 mol/L组0.984(0.354，1.442)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P组α-SMA的相对表达量0.738(0.389，0.774)较空白对照组0.120(0.057，0.120)、C3胞外酶组0.073(0.027，0.093)高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。Y27632+S1P组α-SMA的相对表达量0.142(0.014，0.430)较空白对照组0.544(0.489，0.632)低，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:S1P在毫摩尔水平浓度通过S1P2及其下游信号RhoA/Rho激酶通路调控HFL-1中α-SMA的表达。