齐墩果酸对氯化汞急性暴露致肝损伤的保护作用及可能机制

摘要

[背景]氯化汞(HgCl_(2))急性暴露会导致肝损伤。齐墩果酸(OA)作为一种保肝药物,对HgCl_(2)急性暴露引起肝损伤的保护作用及相关机制尚不明确。[目的]探讨急性HgCl_(2)暴露导致小鼠肝损伤及OA的保护作用及可能机制。40只SPF级C57BL/6雄性小鼠,按照体重随机分为4组,每组10只。分别为对照组、OA组(300 mg·kg^(-1))、HgCl_(2)组(5 mg·kg^(-1))、OA+HgCl_(2)组(300 mg·kg^(-1)OA+5 mg·kg^(-1)HgCl_(2))。连续灌胃豆油、OA溶液两次,一天一次,于第2次灌胃2 h后,腹腔注射HgCl_(2)溶液,观察48 h后处死小鼠。收集小鼠血清和肝脏,计算肝脏系数,采用苏木素-伊红(HE)染色及普鲁士蓝染色观察肝脏结构变化及铁沉积状况。利用丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、组织铁含量试剂盒分别检测相应指标。采用Western blotting法检测小鼠肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)、转铁蛋白受体1(TFR1)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)等蛋白的相对表达量。[结果]HgCl_(2)组小鼠AST、ALT水平分别为(76.447±9.695)U·g^(-1)、(98.563±24.673)U·g^(-1),均高于对照组(P<0.05)。OA预处理后,肝脏系数及上述指标分别降低至(4.769±0.237)%、(57.086±10.087)U·g^(-1)、(87.294±27.181)U·g^(-1),肝脏系数、AST水平与HgCl_(2)组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。HgCl_(2)急性暴露后,小鼠肝细胞排列紊乱,并伴有炎性浸润,肝组织普鲁士蓝染色出现阳性蓝染颗粒;OA预处理后,肝组织上述变化得到改善。HgCl_(2)组肝组织铁含量为(3.646±0.238)μmol·g^(-1),高于对照组的(2.948±0.308)μmol·g^(-1);OA预处理后,铁含量降低至(3.429±0.415)μmol·g^(-1)。与对照组相比,HgCl_(2)急性暴露可导致肝组织GSH、T-SOD水平降低,Nrf2、HO-1、SLC7A11、Gpx4蛋白表达水平降低,MDA水平升高,TFR1蛋白表达水平升高(P<0.05);OA预处理后,各指标均有一定幅度的改善,其中GSH水平升高,MDA水平降低,Nrf2、HO-1、SLC7A11蛋白表达水平升高,TFR1蛋白表达水平降低,与HgCl_(2)组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]急性HgCl_(2)暴露导致小鼠肝损伤,其机制可能涉及铁超载及铁死亡;OA可在一定程度上影响铁超载及铁死亡相关蛋白表达,减轻HgCl_(2)暴露导致的肝损伤。