基于三维细胞模型的反式白藜芦醇对HT-29增殖凋亡影响及机制研究

摘要

目的探讨反式白藜芦醇(trans-resveratrol,trans-Res)对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制和凋亡诱导作用及机制。方法以鼠尾I型胶原为支架建立HT-29三维细胞模型,以5氟尿嘧啶(5-Fu)为阳性对照,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)方法、Annexin V/PI双染法观察不同剂量trans-Res对人源结肠癌HT-29细胞系的生长和凋亡率的影响,运用实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR, qPCR)检测HT-29细胞的Lgr5、Bcl-2、Caspase-3mRNA表达水平。结果不同剂量trans-Res均具有显著的抑制HT-29细胞增殖的作用,同时诱导HT-29细胞凋亡,呈现时间与剂量依赖性(P<0.05),效果优于与相同实验条件下的阳性对照5-Fu。经trans-Res作用后,相较对照组,HT-29细胞Lgr5表达下调(P<0.05)、Bcl-2mRNA表达上调(P<0.05),在药物浓度高于240μmol,作用时间大于24h时,其Caspase-3mRNA表达上调。结论 trans-Res能够显著抑制HT-29细胞的体外增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,其作用可能与Lgr5、Bcl-2、Caspase-3mRNA的表达改变有关。