胰岛素抵抗HepG2细胞模型建立的正交实验研究

摘要

目的探索联合应用胰岛素(INS)、棕榈酸(PA)和高糖建立HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型的最佳实验方法。方法单因素考察INS、PA浓度及孵育时间对HepG2细胞增殖活性的影响;正交实验确定建立HepG2细胞IR模型的最佳条件。蒽酮法检测细胞糖原含量,油红O染色观察细胞形态变化。结果影响HepG2细胞葡萄糖消耗的主次因素顺序为:孵育时间>PA>INS,10 μmol·L-1 PA联合1.0 μmol·L-1 INS的高糖培养基孵育HepG2细胞48 h,葡萄糖消耗减少了22.36%。模型组细胞糖原合成较对照组显著减少,细胞脂肪颗粒明显增加。模型细胞IR作用可持续存在48 h,但24 h时作用最强。结论高糖培养基联合小剂量PA和INS,较长时间作用于HepG2细胞建立的IR模型,稳定可靠,重复性好,接近人体IR的病理生理状态,为防治IR药物筛选及发病机制研究奠定基础。