CRISPR/Cas9介导的IL-6基因敲除对结肠癌SW1116细胞化疗敏感性的影响

摘要

目的 采用成簇的、规律间隔的短回文重复序列/核酸内切酶9 (CRISPR/Cas9)基因组编辑技术构建白细胞介素6(IL-6)基因敲除结肠癌SW1116细胞系,探讨其对化疗药物顺铂(CDDP)的敏感性.方法 采用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,构建IL-6基因敲除的SW1116细胞系;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;Western blot法检测细胞IL-6、cyclin E、Bax、Bcl-2、p-STAT3和STAT3表达.结果 成功构建了IL-6-/+ SW1116和IL-6-/-SW1116细胞系;IL-6-/+SW1116和IL-6-/-SW1116细胞与野生型SW1116细胞相比,其生长状态、细胞增殖能力、细胞周期及细胞凋亡率均无明显差异(P＞0.05);5 mmol/mL CDDP干预后,IL-6-/-SW1116细胞凋亡率明显增加、细胞增殖受到明显抑制、细胞内Bax表达明显增高,Bcl-2、p-STAT3和STAT3表达明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 成功构建了对CDDP敏感,且生长增殖周期稳定的IL-6-/-SW1116细胞系,可为IL-6介导的结肠癌化疗耐药机制研究提供实验基础.