人绒毛膜促性腺激素α亚单位的纯化及其特异性多抗的制备

摘要

目的 纯化人绒毛膜促性腺激素(HCG)α亚单位,制备其多克隆抗体,为进一步研究其功能及临床诊断应用奠定基础.方法 将临床医用注射HCG纯品经尿素处理后,上分子筛分离HCG-α.经纯化、鉴定后,用HCG-α亚单位免疫新西兰兔,分离抗血清,通过rProtein A纯化IgG抗体,随后采用HCG-α及HCG-β制备的抗原亲和层析柱提高IgG多抗的特异性,用ELISA法测定其抗体效价.结果 纯化的蛋白经SDS-PAGE电泳显示单一条带,大小与HCG-α相应分子质量相同.HCG-α多抗效价达1:1 000 000,降低了与HCG-β的交叉反应.结论 建立了简单易操作的分离HCG-α亚单位的方法,并制备了高特异性、高效价的α亚单位多克隆抗体.