RNA干扰Slug基因表达抑制胰腺癌侵袭转移的实验研究

摘要

目的 探讨RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移的抑制作用.方法 用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA (pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA (pNeg-siRNA)导入PANC-1 细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.观察siRNA-Slug对Slug表达的沉默及对胰腺癌细胞体外侵袭转移的抑制作用,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA 的表达水平,Western-blot测定蛋白表达水平.建立不同组裸鼠原位胰腺癌模型,观察Slug沉默对裸鼠原位胰腺癌转移的抑制作用.结果 pSlug-siRNA组细胞内Slug mRNA及Slug蛋白的表达被有效沉默.重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、空白对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(35±10)、(228±71)、(219±72)个/高倍镜(×200),pSlug-siRNA组明显低于空白对照组和pNeg-siRNA组,差异分别有统计学意义(P<0.05).裸鼠体内实验表明,pSlug-siRNA组的肿瘤转移结节、肝脏转移结节、腹水明显减少.结论 RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌细胞侵袭转移有抑制作用,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点.