当归补血汤水提液预处理对缺氧/复氧H9c2心肌细胞线粒体损伤保护机制研究

摘要

目的 探讨当归补血汤预处理对缺氧/复氧H9c2心肌细胞线粒体损伤保护机制.方法 复制缺氧/复氧大鼠H9c2心肌细胞损伤模型,以始终在正常培养条件下的心肌细胞为正常对照组,将预先加入当归补血汤的细胞(当归补血汤组)在正常条件下培养24h,与未处理细胞(模型组)同时进行缺氧/复氧培养,JC-1染色,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,RT-PCR荧光相对定量检测B淋巴细胞瘤2 (Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)、bcl-2/腺病毒E1B 19 000相互作用蛋白3(Bnip3)的mRNA表达水平,Western blot检测细胞色素C蛋白表达水平.结果 与正常对照组比较,模型组线粒体膜电位下降的细胞比例显著增加(P＜0.05),细胞内ROS水平增加明显(P＜0.05),细胞色素C蛋白表达显著升高(P＜0.05),Bcl2 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05),Bax mRNA表达水平显著升高(P＜0.05).当归补血汤干预后,与模型组比较,线粒体膜电位下降的细胞明显减少(P＜0.05),细胞色素C蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),Bcl2 mRNA水平显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 H9c2心肌细胞缺氧/复氧后,线粒体膜电位明显下降,细胞色素C释放增加.当归补血汤可能通过促进Bcl2表达,减少ROS产生等机制稳定心肌细胞线粒体膜电位,减轻复氧后对线粒体功能的损伤作用.