HIV-1临床耐药病毒株药理筛选模型的建立

摘要

目的：建立细胞水平以逆转录酶为靶点的HIV-1临床耐药病毒株药理筛选模型。方法：利用基因点突变技术，在野生型HIV-1的基因组的基础上构建与临床耐药病毒株相一致的突变基因。通过用水泡性口膜炎病毒的糖蛋白（Vesicular stomatitis virus glycoprotein，VSV-G）包装突变型HIV-1核心建立重组的HIV-1临床耐药型伪病毒颗粒，即VSVG／HIV-RT（mutant）伪病毒系统，以荧光素酶报告基因的表达水平检测病毒在靶细胞中的复制水平。结果：经测序验证所构建的突变型HIV-1基因组与临床耐药病毒株一致。建立的重组VSVG／HIV耐药型伪病毒颗粒可以有效地感染靶细胞并进行复制。应用阳性药物奈韦拉平（NVP）和依法韦伦（EFV）对之进行验证，显示耐药型病毒模型的耐药倍数与文献报道基本一致。结论：针对目前临床上棘手的对HIV-1逆转录酶抑制剂耐药的病毒株，我们建立了细胞水平重组HIV-1耐药病毒模型，其对筛选以逆转录酶为靶点的HIV-1新结构类型的先导化合物以及药效学评价有重要的意义。