创伤弧菌溶细胞素抗原表位预测及其噬菌体展示肽的构建

摘要

目的 预测创伤弧菌溶细胞素(vibrio vulnificus cytolysin)的抗原表位,为研制多抗原肽疫苗(MAP)奠定基础.方法 采用生物信息学技术对Vvc的T细胞和B细胞表位进行预测及分析.选取Vvc主要T细胞和B细胞联合表位肽构建噬菌体展示系统.PEG/NaCl沉淀法提纯重组噬菌体,SDS-PAGE鉴定目的重组PIII蛋白(rPIII).Ni-NTA亲和层析法纯化的重组蛋白rVvc常规皮下免疫法制备兔抗血清.rVvc抗血清为一抗,采用Western blot对上述表位肽进行鉴定和筛选.结果 预测的4个主要表位肽Vvha1、 Vvah2、 Vvha3和Vvha4在M13噬菌体中获得成功表达.采用rVvc抗血清为一抗,Western blot对上述表位肽进行鉴定和筛选:Vvha2、Vvha4反应强度高于Vvha1和Vvha3.结论 本实验成功地构建Vvc主要T细胞和B细胞联合表位肽噬菌体展示系统.