同型半胱氨酸致足细胞凋亡中FoxO1 DNA甲基化水平增高

摘要

背景:同型半胱氨酸增多会引起肾损伤并导致足细胞凋亡,但是其具体机制还尚不清楚.目的:探讨叉头框转录因子O1(forkhead box O,FoxO1)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中的作用.方法:体外培养小鼠肾脏足细胞(MPC-5),将其分为对照组(0μmol/L同型半胱氨酸)和同型半胱氨酸组(80μmol/L同型半胱氨酸).干预细胞48 h后,采用免疫荧光技术检验足细胞凋亡相关蛋白Bax、caspase12和Bcl-2的表达情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测FoxO1 mRNA水平;采用Western blot检测FoxO1和DNMT1蛋白表达水平;采用巢式降落式特异性PCR(nMS-PCR)测验FoxO1的DNA甲基化水平.结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组足细胞中Bax和caspase12表达明显增高,Bcl-2表达明显降低;②FoxO1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);③与对照组相比,同型半胱氨酸组FoxO1 DNA甲基化水平明显升高(P<0.01),同型半胱氨酸组足细胞中DNMT1蛋白表达明显增高(P<0.01);④结果表明:FoxO1 DNA高甲基化在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中作用显著,而DNMT1参与同型半胱氨酸诱导的足细胞凋亡过程.