体外人表皮细胞培养技术:不同滋养层细胞对角朊细胞生长融合的影响

摘要

目的:探索和寻找人角朊细胞体外培养适宜的滋养层细胞,完善人角朊细胞体外培养快速扩增的技术和方法.方法:实验于2003-08/2004-03在武装警察部队总医院烧伤整形科组织工程实验室完成.实验分别在3T3细胞、原代培养的人成纤维细胞上接种原代人角朊细胞,并设无滋养层细胞的空白对照.在对不同滋养层细胞的处理上分别采用了60Co放射线照射的传统方法和丝裂霉素处理,比较两种处理方法对滋养层细胞的影响,并对丝裂霉素适宜的作用浓度进行了研究.结果:①丝裂霉素和60Co放射线照射分别处理滋养层细胞,可取得相同效果.②终浓度为15 mg/L的丝裂霉素C是制备人成纤维细胞滋养层的较适宜浓度;终浓度为10 mg/L的丝裂霉素C是制备3T3细胞滋养层的较适宜浓度.③原代人角朊细胞在不同滋养层细胞上的生长速度显示:人成纤维细胞＞3T3细胞＞无滋养层细胞.结论:经丝裂霉素处理的原代培养人成纤维细胞作为滋养层细胞,体外扩增人角朊细胞可以缩短培养时间,减少接种密度.