核因子κ Bp65特异性小干涉核糖核酸抑制肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β诱导的软骨细胞中基质金属蛋白酶9的表达

摘要

背景: 小干涉核糖核酸是核糖核酸干涉的起始诱导物,在细胞内引起强烈的核糖核酸干涉,降解目的基因的信使核糖核酸,以控制目的基因表达.目的: 利用核因子κ Bp65特异性小干涉核糖核酸抑制软骨细胞中肿瘤坏死因子α和白细胞介素1 β诱导的核因子k B的活性及其基质金属蛋白酶9的表达.观察在软骨细胞中核因子k Bp65与细胞因子的关系.设计、时间和地点:单一样本观察,细胞学体外实验,于2006-09/2007-09在北京大学医学部中心实验室完成.材料: SD大鼠关节软骨细胞.方法: 利用质脂体将筛选优化好的核因子k Bp65特异性小干涉核糖核酸转染软骨细胞,特异性抑制核因子k Bp65的表达,继而抑制肿瘤坏死因子α和白细胞介素1 β诱导的核因子k B的活性及基质金属蛋白酶9的表达.主要观察指标: 利用电泳迁移率试验检测核因子k B的活性,反转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印记法分析从信使核糖核酸和蛋白质西水平检测基质金属蛋白酶9的表达.结果: 核因子k Bp65特异性小干涉核糖核酸抑制核因子k Bp65的表达,降低肿瘤坏死因子α和白细胞介索1 β诱导的核因子k B的转录活性,抑制肿瘤坏死因了α和白细胞介素1 β诱导的基质金属蛋白酶9的表达.结论: 在软骨细胞中核因了k Bp65与肿瘤坏死因子α和白细胞介素1 β关系密切.