外胚间充质干细胞的体外分离培养与鉴定☆

摘要

10.3969/j.issn.2095-4344.2012.45.014%　　背景：外胚间充质干细胞不仅可以作为组织工程研究的一种新种子细胞，而且可以为临床神经系统肿瘤提供一种新的治疗策略.目的：体外分离外胚间充质干细胞，对其进行磁珠筛选、形态及超微结构观察、神经干细胞表型鉴定及生长增殖能力检测.方法：从 SD 胎鼠的上下颌突分离出外胚间充质干细胞进行原代培养，培养液中加入磁珠包被的低亲和力神经生长因子受体抗体，进行磁珠筛选纯化.结果与结论：经磁珠筛选后的外胚间充质干细胞呈“成纤维细胞样”细胞，为长梭形，漩涡状生长；透射电子显微镜显示主要为间充质样细胞，形状不规则，细胞增殖活性高，处于未分化状态；免疫组织化学染色结果显示人自然杀伤细胞1、波形蛋白、S-100在细胞浆中呈阳性表达，而细胞角蛋白则为阴性；生长曲线显示呈“S”形，第3天进入对数生长期，第6天进入平台期，其倍增时间 TD=40.28 h.提示体外分离经磁珠筛选纯化扩增的细胞证实为外胚间充质干细胞，其具有干细胞特征.