沉默caspase-3基因影响骨髓间充质干细胞的增殖和凋亡

摘要

背景：缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。目的：观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。方法：构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组，以正常细胞组和空载体组做对照，采用MTS法检测各组细胞增殖情况。建立缺血缺氧模型，real-timePCR和免疫组织化学分别检测缺血缺氧环境各组细胞的caspase-3mRNA和蛋白表达水平，应用流式细胞术检测不同缺血缺氧时间点（0，6，12，24，48h）各组细胞的凋亡率。结果与结论：重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞，且细胞增殖活性升高（P〈0．05）。缺血缺氧环境下，转基因组细胞caspase-3在mRNA和蛋白表达水平相比对照组下降（P〈0．05）。沉默caspase-3能显著降低骨髓间充质干细胞的凋亡率（P〈0．05），且随着缺血缺氧时间的延长凋亡率缓慢升高。结果提示，沉默caspase-3能加快骨髓间充质干细胞的生长速度和提高在体外缺血缺氧环境下的抗凋亡能力。